熒光強(qiáng)度計(jì)基于光致發(fā)光現(xiàn)象:當(dāng)熒光物質(zhì)受到激發(fā)光(如氙弧燈、溴鎢燈等)照射時(shí),吸收能量躍遷至激發(fā)態(tài),隨后返回基態(tài)時(shí)發(fā)射出波長(zhǎng)更長(zhǎng)的特征熒光。儀器通過(guò)測(cè)量熒光的強(qiáng)度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法或直接比較法,實(shí)現(xiàn)物質(zhì)濃度或特性的定量分析。
熒光強(qiáng)度計(jì)的操作注意事項(xiàng):
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法:
配制一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,測(cè)定其熒光強(qiáng)度,繪制以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
后續(xù)樣品分析需在相同條件下進(jìn)行。
溫度控制:
熒光強(qiáng)度受溫度影響顯著,測(cè)試時(shí)溫度變化應(yīng)控制在±3℃以?xún)?nèi)。
高級(jí)熒光計(jì)配備液槽冷卻裝置,以維持溫度恒定。
pH值調(diào)節(jié):
對(duì)于弱酸或弱堿類(lèi)熒光物質(zhì),溶液pH值會(huì)影響分子電離平衡,進(jìn)而改變熒光強(qiáng)度。
需通過(guò)條件試驗(yàn)確定最適pH范圍。
熒光猝滅劑:
鹵素離子、重金屬離子、溶解氧等可能引起熒光熄滅,需在實(shí)驗(yàn)中除氧或避免使用猝滅劑。